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          重点实验室

          重点实验室

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          重点实验室

          辽宁省实验动物模型重点实验室是辽宁省科技厅2013年设置的省重点实验室,经过多年的建设,已建成集模式生物研发、生产和动物实验服务三位一体的综合性服务平台。提供常规转基因、常规基因敲除、条件型基因敲除和基于CAS9技术的基因编辑小鼠、仓鼠等临床模式动物制备服务以及动物代繁代养服务等。

           


           

          基因修饰动物模型

           

          1、转基因制作

           

          转基因是将外源DNA通过显微注射的方法注射到小鼠受精卵的原核内,注射DNA整合到受精卵的基因组中,并遗传给后代。

           

          2、基因敲除(KO)

           

          用大小鼠基因特异sgRNA(single-guide RNA)介导Cas9核酸酶切割DNA出现特定的DSBs( double-stranded breaks),通过NHEJ(nonhomologous end joining)修复途径造成靶基因的Indel ( insertion/deletion),产生移码突变(frameshift mutations)、翻译提前终止(premature stop codon)或者片段删除,从而实现基因敲除。成功率高达100%,且不受品系限制,可以实现多基因同时敲除。

           

          3. 基因敲入(KI)

           

          (1) 特定位点寡核苷酸突变

          在小鼠基因组中的特定位点敲入突变,包括单个或多个碱基突变、单个或多个氨基酸突变等。

          (2)  特定位点基因敲入

          在小鼠基因组中的特定位点敲入异源基因,如:荧光蛋白,LacZ,Luciferase,CreERT2,LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP等。

           

          4. 条件性基因敲除(CKO)

           

          条件性基因敲除是通过Cre-LoxP/FLP-Frt重组系统来实现的。在目的基因两端各放置一个LoxP序列,得到Floxed小鼠。将Floxed小鼠与Cre小鼠交配,即可获得目的小鼠。

           

          5. 诱导性点突变制作

           

          利用Cre重组酶介导的删除和倒位,可以实现目的基因的诱导性点突变。

           


           

          动物模型

           

          小鼠品系模型 地鼠品系模型 人源肿瘤异种移植模型
          TP53小鼠模型 AS160地鼠模型 胃癌移植瘤NYG小 鼠模型
          APOE小鼠模型 PRKDC D140地鼠模型 肺癌移植瘤NYG小鼠模型
          LDLR小鼠模型 NOS3地鼠模型 肝癌移植瘤NYG小鼠模型
          NEO小鼠模型 PCSK9 D22地鼠模型 食道癌移植瘤NYG小鼠模型
          AS160小鼠模型 PCSK9 D380Y地鼠模行 胰腺癌移植瘤NYG小鼠模型
          ACE2小鼠模型 MIR223地鼠模型 结直肠癌移植瘤NYG小鼠模型
          NYG D10-D50小鼠模型 Leptin地鼠模型  
          APP/PS1小鼠模型 LDLR APOE和LDLRMUT717地鼠模型  
          NOD SCID与NYG以及NYG D10-D50与NYG小鼠模型
             

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           


           

          模型制备

           

          药物诱导模型 手术诱导模型 转基因模型
          肺纤维化模型(气管给药) 脑缺血再灌注模型(颈动脉结扎法) 基因工程小鼠制备(显微注射)
          慢性心衰模型(注射给药) 大脑中动脉栓塞和缺血再灌注模型(线拴法) 模型小鼠保种(活体/胚胎冷冻)
          帕金森/癫痫模型(脑立体定位法) 心肌梗死模型(开胸法) 模型小鼠代养与扩繁(体外受精扩繁)
          哮喘模型(雾化法) 坐骨神经钳夹和离断模型  
          肿瘤皮下成瘤模型(皮下注射法) 脊髓损伤模型(打击器法)  
          肿瘤PDX模型(组织块移植) 肾缺血再灌注模型(肾动脉结扎法)  
          溃疡性结肠炎模型 骨质疏松模型(卵巢摘除法)  
          妊娠糖尿病模型 肝纤维化/肝硬化模型(胆总管结扎法)  
          类风湿关节炎动物模型 脓毒血症模型(盲肠结扎穿刺法)  
          糖尿病肾病模型 血管内皮损伤模型(球囊/导丝法)  

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           


           

           

          干细胞及免疫细胞
           
          间充质干细胞分离、鉴定、培养、分化及各种疾病研究
           
          免疫细胞分离、诱导培养、鉴定及各种疾病研究

           

           


           

           

          细胞功能学

           

          细胞活性检测、细胞增殖检测、细胞凋亡检测、细胞周期检测、细胞自噬检测、细胞坏死检测、细胞焦亡检测、细胞铁死亡检测、细胞迁移能力检测、细胞划痕检测、细胞黏附能力检测、细胞侵袭能力检测、细胞免疫化学染色、细胞免疫荧光染色、细胞RNAscope实验、细胞线粒体自噬检测、细胞内质网应激检测、细胞荧光原位杂交(FISH)实验。

           

           


           

          分子生物学

           

          DNA提取、DNA甲基化、基因多态性检测、转录因子功能及调控

          RNA提取、RNA甲基化、lncRNA表达及调控、circRNA表达及调控、miRNA加尾法PCR、miRNA茎环法PCR

          载体构建、病毒制备、双荧光素酶实验、EMSA实验、RNA pull-down、RNA免疫共沉淀(RIP)、染色质免疫共沉淀(CHIP)

          蛋白提取、蛋白修饰检测、蛋白活性分析、免疫共沉淀

          Western 杂交、Southern 杂交、Northern 杂交、定量RT-PCR检测

           

           


           

          病理形态

           

          普通病理:脱钙与软化、标本包埋、切片、HE染色、特殊染色

          分子病理:免疫组化、免疫荧光、TUNEL、原位杂交

          病理图像:切片扫描、共聚焦、拍照分析、三维重建、AI病理分析

          超微病理:透射电镜、扫描电镜能谱、电镜分析、免疫电镜

           

           


           
           
          多组学研究
           
          高通量测序
          蛋白质组
          代谢组
           
           
           

           
           
          磁纳米粒子及精密磁检测技术
           
          磁粒子成像

           

          免洗型磁标记免疫分析

           

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